РусскийEnglish (UK)
     
 

Анализ результатов липидемического исследования весьма сложен. Для упрощения, для лучшего понимания предложена такая тепловая шкала: цвет от синего до красного меняется в зависимости от изменения соотношения этих липидов в пользу людей с низким или высоким уровнем холестерина. Такая группировка позволяет хорошо представить себе преобладание липидов одной или другой группы (красный или синий). Таким образом из всего липидемического анализа удается идентифицировать те липиды, которые в наибольшей степени ассоциированы с высоким или низким уровнем α-холестерина.

На этом слайде в качестве примера представлены «ящичные» диаграммы по сравнению средних значений и распределений по разным классам липидов для людей с низким и высоким уровнем α-холестерина. Видно, что очень большое значение имеет содержание полиненасыщенных жирных кислот. По ним получены наибольшие различия между пациентами.

Дело в том, что сам по себе уровень холестерина липопротеидов высокой плотности особо о многом не говорит, необходимы еще и функциональные тесты, то есть насколько липопротеидные частицы функциональны и способны оказывать положительное действие на тканевой метаболизм. Можно выделить 5 групп функций липопротеидов высокой плотности. Первая – обратный транспорт холестерина, то есть удаление его из пенистых клеток. Не менее интересными функциями частиц являются их антиокисдантные способности, их влияние на способность эндотелия синтезировать NO, приводящий к расслаблению сосудистой стенки и снижению тонуса сосудов, противовоспалительное действие частиц.

Принципиальная схема эксперимента по оценке эффективности обратного транспорта холестерина. Используются моноциты. Это могут быть, в зависимости от потребностей эксперимента, линейные клетки (в частности, линия человеческих макрофагов HP1, линия мышиных макрофагов MG774). Если есть необходимость, можно выделить клетки из крови здоровых доноров – моноциты сажаются в культуру в присутствии колониестимулирующего фактора, в течение 7 дней они созревают до макрофагов, а дальше их экспериментальным образом превращают в «пенистые» клетки – нагружают их радиоактивно-меченными ацетилированными липопротеидами низкой плотности, можно нагружать окисленными или ферментативно-модифицированными липопротеидами. В зависимости от потребностей эксперимента можно использовать для нагрузки любые частицы, которые могут вызывать накопление холестерина в клетках. После 48 ч инкубации культивируемые клетки превращаются в типичные «пенистые» клетки, характерные для атеросклеротических поражений. Цитоплазма таких клеток забита липидными каплями. А после этого их промывают и нагружают уже акцепторами, тоже в зависимости от цели эксперимента. Можно добавлять липопротеиды высокой плотности, выделенные из крови человека, цельную сыворотку человека или сыворотку, обработанную полиэтиленгликолем (ПЭГ). ПЭГ осаждает более крупные частицы липопротеидов, остаются, преимущественно, липопротеиды высокой плотности. В течение 4-16 ч идет инкубация клеток, а после этого уже или в среде, или в растворенных щелочью клетках измеряется радиоактивность. В итоге становится ясно, сколько захваченного клетками радиоактивного материала в итоге вышло в культуральную среду.